细胞分选
根据细胞所具有的特性把某种特定的细胞亚群从混合的细胞样品中分离出来的一种技术,它是对某一特定细胞进行生化分析和功能分析的前提和基础。
表1. 常见细胞分选技术(磁性分选、流式分选)对比
常见细胞分选技术 |
分选结果 |
安全性 |
其他 |
细胞磁性分选技术 |
1、适宜进行单Marker分选 2、分选纯度好,得率高 3、分选对细胞无损,尤其适用于免疫细胞分选 |
1、阴选试剂盒(需要的细胞标记)。 2、阳选纳米级磁珠安全、可靠,生物可降解基质,无需额外去除。
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1、不需要昂贵的设备、操作简单。 2、阴选试剂盒无需分选柱,阳选纳米磁珠所需磁珠用量少。
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流式细胞分选技术
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1、多Marker分选,纯度高,得率好 2、传统流式分选:高压高速对细胞冲击较大,细胞受损严重
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1、容易交叉污染 2、带荧光抗体使用存在争论 |
1、设备昂贵、操作难度较大,需要专门操作人员进行操作和数据分析 |
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由上表可知,细胞磁性分选技术由于其简单快捷的操作,分选细胞纯度好、得率高、活性好等特点,已成为目前使用最广泛的细胞分选技术。
目前细胞磁性分选可以分为阴性分选和阳性分选两种方式。阴性分选一般搭配无柱分离(阴选抗体加磁珠两步标记),阳性细胞分选一般搭配有柱分离(阳选抗体磁珠一步标记)。
表2. 阴性分选(无柱分离)、阳性分选(有柱分离)对比
磁性分选技术 |
阴性分选(无柱分离) |
阳性分选(有柱分离) |
磁珠粒径 |
粒径250 nm~4.5 μm的磁珠 |
粒径<100 nm的磁珠 |
磁珠标记细胞 |
生物素标记抗体Cocktail(所有不需要细胞的表面标识抗体)加入细胞悬液中孵育,链霉亲和素磁珠再加入细胞悬液孵育,磁珠标记所有不需要的细胞。 |
阳性抗体磁珠(带一种需要细胞表面标识抗体的磁珠)加入细胞悬液孵育,磁珠标记需要的细胞。 |
细胞分选 |
磁珠标记细胞的试管入磁铁,并孵育,倒出非标记细胞,即为所需细胞。 |
分离柱进磁铁,加入磁珠标记细胞,加缓冲液洗出非标记细胞,分离柱取出磁铁,用活塞推出磁珠标记细胞。 |
优点 |
需要的细胞未经标记。 |
分选细胞纯度高、特异性高, 所需磁珠用量少。 |
缺点 |
需要知道所有不需要细胞的表面标识抗体, 磁珠用量多,特异性稍差。 |
可能会对细胞产生一定的激活作用 |
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阴性分选(无柱分离)流程示意图:
阳性分选(有柱分离)流程示意图:
翌圣生物拥有高性能单克隆抗体研发平台,凭借其丰富的抗体和磁珠等开发经验,全力开发推出细胞分选产品,提供高质量的分选磁珠、耗材及设备,满足客户的研发和生产需求。目前已上新针对小鼠免疫细胞的CD3、CD4、CD8阴选试剂盒和分离磁铁,针对小鼠免疫细胞的科研级CD4、CD8阳选磁珠,后续产品持续开发中。
翌圣生物提供小鼠T细胞分选整体解决方案
表3. 翌圣小鼠T细胞分选系列产品选购指南
产品定位 |
小鼠T细胞阴选试剂盒(阴选,无柱分离) |
小鼠T细胞阳选磁珠(阳选,有柱分离) |
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产品货号 |
37653ES |
37657ES |
37661ES |
37607ES |
37611ES |
产品名称 |
Mouse CD3+T Cell Isolation Kit(Negative Isolation) |
Mouse CD4+T Cell Isolation Kit(Negative Isolation) |
Mouse CD8+T Cell Isolation Kit(Negative Isolation) |
Mouse CD4 Nanobeads |
Mouse CD8 Nanobeads |
规格 |
10T/ 50T/ 100T |
10T/ 50T/ 100T |
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分选能力 |
Up to 1×108 cells/Up to 5×108 cells/Up to 1×109 cells |
Up to 1×108 cells/Up to 5×108 cells/Up to 1×109 cells |
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有效期 |
2~8℃保存,有效期1年。 |
2~8℃避光保存,有效期6个月。 |
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产品特点 |
操作简单:无需分选柱,使用磁性分离器即可实现目的细胞的分离。 纯度高:分选细胞纯度可达95%以上; 速度快:15分钟即可分选得到目的细胞。 活性好:阴性分选,磁珠不与细胞直接接触,分选后细胞无异常激活,不影响下游实验。 |
安全性高:磁珠粒径(50~100 nm)与进口竞品等同,低毒。 效果好:纯度高、活性高、回收率高。 操作方便:生物可降解基质、无需额外去除。 质量高:稳定性高、兼容性高。 |
测试数据
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小鼠T细胞阴选试剂盒测试
图1. 翌圣小鼠CD3、CD4、CD8分选试剂盒(阴选)分选免疫细胞的纯度对比图
备注:使用翌圣小鼠CD3、CD4、CD8分选试剂盒(阴选)从 C57BL/6 小鼠脾脏细胞中分选CD3、CD4、CD8 T细胞,通过流式检测分选得到的细胞组分中 CD3、CD4、CD8 T细胞纯度,分选后细胞纯度分别为97.6%、98.8%、97.1% 。
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小鼠T细胞阳选磁珠测试
图2. 翌圣小鼠CD4、CD8分选磁珠(阳选)和进口竞品分选免疫细胞的纯度、回收率、细胞活率对比图
备注:分别使用翌圣小鼠CD4、CD8分选磁珠与进口竞品磁珠从C57BL/6 小鼠脾脏细胞中分选CD4、CD8 T细胞,翌圣小鼠CD4、CD8分选磁珠分选后细胞的纯度、回收率、细胞活率均与进口竞品相当。
产品信息
产品定位 |
产品名称 |
货号 |
规格 |
分选能力 |
小鼠T细胞阴选试剂盒 (阴选,无柱分离) |
Mouse CD3+T Cell Isolation Kit(Negative Isolation) 小鼠CD3+T细胞分选试剂盒(阴选) |
10 T/50 T/ 100 T |
Up to 1×108 cells/ Up to 5×108 cells/ Up to 1×109 cells |
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Mouse CD4+T Cell Isolation Kit(Negative Isolation) 小鼠CD4+T细胞分选试剂盒(阴选) |
10 T/50 T/ 100 T |
Up to 1×108 cells/ Up to 5×108 cells/ Up to 1×109 cells |
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Mouse CD8+T Cell Isolation Kit(Negative Isolation) 小鼠CD8+T细胞分选试剂盒(阴选) |
10 T/50 T/ 100 T |
Up to 1×108 cells/ Up to 5×108 cells/ Up to 1×109 cells |
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5 mL金属磁力架 |
1个 |
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小鼠T细胞阳选磁珠 (阳选,有柱分离) |
Mouse CD4 Nanobeads 小鼠CD4分选磁珠 |
10 T/50 T/ 100 T |
Up to 1×108 cells/ Up to 5×108 cells/ Up to 1×109 cells |
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Mouse CD8 Nanobeads 小鼠CD8分选磁珠 |
10 T/50 T/ 100 T |
Up to 1×108 cells/ Up to 5×108 cells/ Up to 1×109 cells |